İlke
Nişasta çözeltisini bal örnek çözeltisine koyduktan sonra, bazı nişasta balda diyastaz ile hidrolizdir.
Reaktifler ve Malzeme
Spesifik bildirimi olanlar hariç, AR derecesi reaktifleri kullanılır;
Reaktif:
1. iyot.
2. Potasyum iyodür.
3. Sodyum asetat (CH3Coona · 3H2O).
4. Buzlu asetat asidi
5. Sodyum klorür.
6. Çözünür nişasta.
7. İyot stok çözeltisi: 30ml ~ 40ml su ile karıştırılan 8.8g iyot ve 22G potasyum iyodür tartın, 1000 ml'ye kadar seyreltin.
8. İyot çözeltisi: 20g potasyum iyot tartın, 5ml iyot stok çözeltisi ekleyin, su ile 500ml'ye seyreltin (bu çözelti sadece 2 gün kullanılabilir).
9. Asetat tampon çözeltisi: pH 5,3 (1,59 mol/L). 87 g Sodyum Asetat tartın ve 400 mL suda seyreltin. 10,5 mL buzlu asetat asit ekleyin ve 500 mL'ye seyreltin. Gerekirse, pH değerini 5,3'e ayarlamak için sodyum asetat veya asetat asit kullanın.
10. Sodyum klorür çözeltisi (0,5 mol/L): 14,5 g NaCl'yi tartın, 500 mL suda çözün.
11. Nişasta Çözelti: 2G'yi 90ml suda çözünür nişastayı çözün.
Teçhizat:
1. UV-Vis spektrofotometre.
2. Sabit sıcaklık hücre tutucusu
Örnek hazırlama ve koruma
Örnek hazırlama:
Numuneyi iyice karıştırın, ardından test numunesi olarak 0.5kg bir numune şişesine aktarın.
Not: Kristal görünüp görünmüyor olsun, tüm numune ısıtılamaz.
Örnek Koruma:
Numune oda sıcaklığı altında korunabilir.
Deney prosedürü
Standart Nişasta Çözüm Testi
5.0 ml nişasta çözeltisi (reaktif 11) ve 10.0 ml su ölçün, 40 ℃ su banyosuna 15 dakika ayrı ayrı yerleştirin.
Örnek Testi:
1. Spektrofotometre koşulları:
A) Dalga boyu: 660Nm
b) Referans: Su
2. Numune ön işlem: 5G (± 0.01g) hazırlanan numune ölçün ve 20ml'lik bir behere aktarın.
3. 5ml nişasta çözeltisi, 10ml numune çözeltisi (numune testi 2) ve 10ml iyot çözeltisini ölçün, 40 ℃ su banyosuna 15 dakika ayrı ayrı yerleştirin.
4. 5 dakika sonra 1.0 ml karışık çözeltiyi 10 mL ısıtılmış iyot çözeltisine aktarın ve kaydedilen miktarda su (standart nişasta çözeltisi aşamasında kaydedildi) ile seyreltin ve tekrar iyice karıştırın.
5. Absorbans 0.235'ten büyükse, absorbans 0.235'ten az olana kadar 4. adımın tekrarlanması gerekir.
6. Ölçüm sırasında karışık çözelti, iyot çözeltisi ve su 40 su banyosunda tutulmalıdır.
Hesaplama
Bir logaritmik koordinat kağıdında, Absorbans (%) olarak Y eksenini ve zaman (min) olarak X ekseni adını.
Burada x çözeltideki diyastaz sayısıdır (ml/(g · h)), t karşılık gelen süre (min).
Sonuçlar
Bu yöntem kullanılarak, deneyin tekrarlanabilirliği ve tekrarlanabilirliği ≥'tir.
